可見分光光度計是用于檢測和跟蹤被測物質對可見光吸光度進行定量分析的儀器設備。

工作原理

　　溶液中的物質受下，溶液中的物質對光的吸收有選擇性的影響。各種不同的物質都有自己的吸收光譜，所以當單色光通過溶液時，它的能量會被吸收和減弱，光能的減弱程度與物質濃度有一定的比例，即符合朗伯一比爾定律(見圖片3-10)。

　　當液體的光程長度保持不變時，通過光根據溶液的濃度而變化。可見，分光光度計的基本原理是根據上述物理光學現象設計的。

分光光度計儀器的結構

　　分光光度計由磁飽和穩壓器、單色器和檢流計三部分組成。使用時，應使用導線3-11接好。

　　單色器和穩壓器的輸出接線柱5.5V或10V連接，然后根據導電片上套管的顏色，將單色器連接到檢流計，紅色套管的導電片連接到十，綠色套管的導電片連接到一，第三個導電片接地線。穩壓器和檢流計分別連接220V電源。

光柵分光光度計的結構

　　光柵分光光度計采用自準色散系統和單光束結構，色散元件為衍射光柵，波長為330~800nm數字顯示讀數也可以直接測量溶液的濃度。其形狀如圖所示3-12所示。

使用分光光度計的方法

　　(1)在連接電源之前，穩壓器、檢流計和單色器的電源開關應關閉。光量調節器逆時針轉向最小位置，單色器光門撥打黑點，然后連接穩壓器和檢流計220V交流電源。

　　(2)打開檢流計電源開關，從斷開到直接或直接X1檔，指示光點出現在標尺上，用零位調節器準確地將光標調整到透光標尺的0點。

　　(3)打開穩壓器和單色器的電源開關，將光閘撥到紅色點，然后順時針旋轉光調節器，使檢流計的指示光標線達到標尺上透光率的100%附近，并進行預熱10min光標穩定后再使用。(4)將波長調節器調整到所需的波長。

　　(5)將單色器的光閘門撥到黑點，再次檢查檢流計的零位(即透光率為0)。

　　(6)將盛有空白溶液的比色皿放入比色皿架的第一格中，剩下的=放入待測溶液，蓋上暗箱蓋，將空白溶液推入光路(拉桿推到底)。將光閘撥到紅點，輕輕調節光量調節器，將光標準確調節到透光率100讀數。

　　(7)拔出拉桿，使有色溶液進入光路，光標所指A值是溶液的吸光度，然后依次測量其他溶液。

　　(8)測量完成后，取出比色皿，倒出溶液，用蒸餾水沖洗干凈，吸干，放回比色皿盒中。所有旋鈕和開關恢復到使用前狀態，切斷電源，覆蓋儀器。

注意

　　1)打開電源前，檢查每個調整旋轉問題是否在起始位置，然后打開電源開關。儀器停止工作時，必須將開關放在關閉上，然后切斷電源。

　　2)只要空白溶液的透光率能調整到100，單色器的電源電壓應用5.5V,不用10V。這主要是為了延長光源燈的使用壽命，降低單色器的溫度。

　　3)檢流計背面有兩個電源插孔，分別標有220V”和“6V”。若用220V交流電源時，導線插頭應橋入220V孔內，人用6V直流電源應插入導線插頭6V孔內，不要插錯。否則，儀器將被燒壞。

　　4)在儀器使用過程中，應注意光電池的保護，長期選擇·間照而疲勞。更換溶液并記錄讀數時.將光聞門及時拔到黑點，切斷射光。

　　5)注意保護比色皿透光面的清潔度。使用時只能用手拿毛玻璃面，不要拿透光面。據擦拭外部溶液時，只能使用鏡頭紙。

　　6)比色皿盛放溶液不能超過其高度的4/5,以免溶液溢入機件內部。

　　光柵分光光度計的使用方法

　　(1)連接電源前，檢查儀器的安全性。電源線接線應牢固，接地線接地應良好，各調節旋鈕的起始位置應正確，然后連接電源。

　　(2)將靈敏度派或調整到1檔(最小放6倍率)。調波長調節器至所需波長。

　　(3)打開電源開關，指示燈亮，選擇開關放在‘’T調整透光率100%旋鈕，使數字顯示100.0左右，預熱20min。

　　(4)打開吸收地暗室蓋(光門自動關閉)，調整0旋鈕，使數字顯示為000.0蓋上吸收地蓋，將參考溶液放在光路中，使光電管受光，調整透光度100%旋鈕，使數字顯示為100.0”。

　　(5)如果不顯示100，可以適當增加電流放大器的靈敏度檔數，但應盡量使用低檔數，使儀器穩定性更高。改變靈敏度后，必須重新校正0和100。

　　(6)連續幾次按(4)調整00.0在100和100之后，將選擇開關放在A調整吸光度，調整零旋鈕，使數字顯示為.000”。然后將待測溶液推入光路,顯示值即為待測樣品的吸光度值A。

　　(7)濃度c測量。開關的選擇由A”旋至“c將標準溶液推入光路，調整濃度旋鈕。使數字顯示值為已知的標準溶液濃度值。將待測樣品晶體溶液推入光路，讀取待測樣品的濃度值。

　　(8)在大幅度改變測試波長時，調整00.0和100等一會兒(由于光能變化急劇，光電管受光后響應緩慢，需要一段光響應平衡時間)，穩定后重新調整00·0和100一起工作。

　　注意:

　　1)使用前，用戶應首先了解儀器的結構和原理，以及每個旋鈕的功能。

　　2)儀器接地良好，否則顯示數字不穩定。

　　3)儀器左下角有干操劑筒，應保持干燥，干操劑變色后應立即更新或干燥。

　　4)儀器停止工作時，切斷電源，同時切斷電源開關，并密封儀器。

　　以上介紹了可見分光光度計的工作原理、結構外觀和使用方法，希望為行業相關試用人員提供一些參考。